本载体是以酿酒酵母为表达菌株，带有双启动子的表达质粒。本质粒可以在多克隆位点(MCS)按照开放读码框(ORF)插入不带有终止密码子的目的基因，经半乳糖诱导可以通过GAL1 promoter表达C端带有His标签的目的蛋白或通过GAL10 promoter表达C端带有Flag标签(Flag Tag,DYKDDDDK)的目的蛋白，并且这两种蛋白可以同时表达。
本质粒含有相反方向的酵母启动子GAL1和GAL10，可以将一个或两个目的基因引入酵母宿主菌株中。在GAL10 promoter后的MCS插入目的基因时，需要目的基因带有起始密码子，而在GAL1 promoter后的MCS插入目的基因时，由于α-factor信号肽已带有起始密码子，插入的目的基因不需要带有起始密码子。当两个基因分别插入两个MCS共表达时，可以通过免疫沉淀分析确认蛋白质与蛋白质的相互作用。本质粒含有酵母2μ origin复制子，2μ origin的序列最初是从天然存在的酵母2μ质粒中分离出来，因此含有2μ origin能够在酿酒酵母中自主复制质粒。
本质粒含有α-factor信号肽序列，可以用于目的蛋白的分泌表达。α-factor信号肽引导目的蛋白进入分泌通路后，Kex2基因编码的类枯草菌素蛋白酶识别α-factor C末端的EKREAEA序列，并在KR之后进行剪切，这样目的蛋白N端会携带4个氨基酸残基(EAEA)，此时可能被Ste13基因编码的二肽蛋白酶氨基肽酶A识别并切割，因此分泌到胞外的目的蛋白的N端可能会残留2～4个氨基酸残基。
本质粒含有氨苄青霉素(Ampicillin)抗性和URA3筛选标记。在大肠杆菌中呈现氨苄青霉素抗性。本质粒转化酵母细胞后，可利用URA3筛选标记，转化酿酒酵母Ura营养缺陷型菌株，如酿酒酵母INVSc1 (D0432)，在不含Uracil的培养基中筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
| 组分 | 1μg | 100μg |
| pGAL1,10-α factor-His-Flag-URA载体 | 1μg | 100μg |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存：-20℃
| Feature Nucleotide | Position |
| URA3 promoter | 201..416 |
| URA3 | 417..1220 |
| f1 ori | 1351..1806 |
| ADH1 terminator | 1885..2050 |
| FLAG | 2198..2221 |
| GAL1,10 promoter | 2268..2932 |
| UAS | 2484..2601 |
| T7 promoter | 2943..2961 |
| α-factor secretion signal | 2968..3237 |
| 6×His | 3286..3303 |
| CYC1 terminator | 3311..3500 |
| ori | 3743..4331 |
| AmpR | 4502..5362 |
| AmpR promoter | 5363..5467 |
| 2μ ori | 5494..6836 |
| FRT | 6457..6504 |
pGAL1,10-α factor-MCS-His-MCS-Flag-URA的多克隆位点的详细图谱：
- pGAL1,10-α factor-MCS-His-MCS-Flag-URA中没有的酶切位点包括：
AarI AatII AbsI AccIII AccB7I AcvI AflII AleI Aor13HI AscI AsiSI AspI AspA2I AvrII AxyI BaeI BalI BbeI BbrPI BbvCI BclI BfrI BlnI BlpI BoxI BplI Bpu1102I BsaBI Bse8I Bse21I BseAI BseJI BsePI BsiWI Bsp13I Bsp68I Bsp1720I BspEI BspTI BssHII Bst98I BstAFI BstEII BstENI BstHPI BstPI BstPAI Bsu36I BtuMI CelII CpoI CsiI CspI DinI Eco72I Eco81I Eco91I EcoNI EcoO65I EgeI EheI FbaI FseI FspAI HpaI I-CeuI I-PpoI I-SceI KasI KflI Kpn2I Ksp22I KspAI MabI MamI MauBI MlsI MluNI Mly113I Mox20I MreI MroI MscI Msp20I MspCI MssI NarI Nb.BbvCI NruI Nt.BbvCI OliI PalAI PaqCI PasI PauI Pfl23II PflFI PflMI PI-PspI PI-SceI PluTI PmaCI PmeI PmlI PshAI PspCI PspEI PspLI PsrI PsyI PteI RgaI RigI RruI RsrII Rsr2I SanDI SexAI SfaAI SfiI SfoI SgfI SgrAI SgrDI SgsI SmiI SrfI SspDI SwaI Tth111I Van91I Vha464I XagI XmaJI ZraI - pGAL1,10-α factor-MCS-His-MCS-Flag-URA中的单酶切位点包括：
Acc65I AgeI AhdI ApaI BamHI BfuAI BglII BmgBI BmtI Bpu10I BsaHI BsgI BsmI BspDI BspMI BsrGI BstXI ClaI CspCI EagI Eco53kI EcoRI EcoRV HindIII KpnI MfeI MluI NaeI NcoI NdeI NgoMIV NheI NotI PacI PspOMI PspXI PstI SacI SacII SalI SbfI SmaI SnaBI SpeI SphI StuI TspMI XmaI
pGAL1,10-α factor-MCS-His-MCS-Flag-URA质粒中对于插入片段进行测序时，推荐使用的正向测序引物GAL1-F、GAL10-F和反向测序引物GAL1-R、GAL10-R的序列如下：
GAL1-F (2837-2857)：5'-ATTTTCGGTTTGTATTACTTC-3'
GAL1-R (3377-3397)：5'-GTTCTTAATACTAACATAACT-3'
GAL10-F (2319-2340)：5'-GGTGGTAATGCCATGTAATATG-3'
GAL10-R (2118-2140)：5'-GGCAAGGTAGACAAGCCGACAAC-3'
- 本质粒未经我司书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 首次使用1μg包装的本制品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
- 100μg包装的本制品质粒浓度为0.1μg/μL，共1mL。可以直接用于酶切或者转染细胞。
- pGAL1,10-α factor-MCS-His-MCS-Flag-URA质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，需注意插入基因片段和tag之间的读码框要一致，即需要避免发生移码突变。
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